chip蛋白實驗技術服務

簡要描述：chip蛋白實驗技術服務
研究蛋白質和DNA在染色質環境下的相互作用是闡明真核生物基因表達機制的基本途徑

更新時間：2023-10-30
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應用領域	醫療衛生,生物產業

chip蛋白實驗技術服務

上海伊萊博生物科技有限公司成立于2005年，公司位于上海長江軟件園，實驗室面積600多平方米。公司目前具備較好的的生物學、醫學技術服務平臺，能夠為廣大客戶提供醫學科研樣本檢測、合作研究、開發及生產服務。

chip蛋白實驗技術服務操作流程：
1 、樣品準備與交聯
細胞收集后，用37%的formaldehyde處理細胞，交聯核酸與DNA結合蛋白；
2. 超聲打斷染色質
裂解細胞，用Bioruptor將染色質超聲破碎成200－1000bp片斷；將片段分為兩份，一份用于免疫共沉淀，一份用于對照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步驟所得一份片斷與ChIP特異抗體結合進行免疫共沉淀，利用免疫磁珠法富集抗體復合物。
4 、解交聯及純化 DNA
將富集的DNA/蛋白復合物解交聯釋放DNA的片段，并進行純化（IP DNA）；B步驟所得用于對照（Input DNA）的片斷作不進行IP實驗，但也要解交聯并純化。
5 、 DNA 段 PCR 擴增
針對ChIP DNA, Input DNA及對照DNA的目的片段設計特異性引物并進行熒光定量PCR擴增。
6 、結果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]

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