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探討脊髓神經元原代培養的步驟及條件

更新時間:2024-10-18      點擊次數:970
  脊髓神經元原代培養是一種將胚胎哺乳動物中樞神經系統的脊髓組織直接取出,并進行接種培養的方法。其主要目的是獲取高度分化的脊髓神經元細胞,用于研究神經源性疾病的發病機制、進程,以及神經細胞的發育狀況和生理活性。
  脊髓神經元原代培養的培養步驟:
  1、取材:通常選擇胎鼠或新生鼠的脊髓作為培養材料,因為這些時期的脊髓神經元具有較高的增殖能力和分化潛力。取材過程需要在無菌條件下進行,以避免污染。
  2、組織處理:將取出的脊髓組織進行仔細剝離,去除脊膜及血管,然后剪成小塊,以便后續消化。
  3、消化與分散:使用胰蛋白酶等消化酶將脊髓組織消化成單個細胞懸液。消化過程中需要控制消化時間和溫度,以避免對細胞造成損傷。
  4、接種與培養:將消化后的細胞懸液接種到預先涂有PLL等促進細胞貼壁的物質的培養板中,然后置于37℃、5%CO2的培養箱中進行培養。培養過程中需要定期更換培養基,以保持細胞的生長環境。
  脊髓神經元原代培養的培養條件:
  1、溫度:通常維持在37℃左右,以模擬細胞在體內的生長環境。
  2、氣體環境:需要提供5%CO2的氣體環境,以維持細胞的酸堿平衡和生長所需的氧氣濃度。
  3、培養基:通常使用含有胎牛血清、阿糖胞苷等營養成分的DMEM培養基,以支持脊髓神經元的生長和分化。
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