過(guò)氧化氫誘導(dǎo)動(dòng)物模型造模方法

2.1、原理：根據(jù)黑色素不穩(wěn)定， 易受強(qiáng)氧化劑過(guò)氧化氫破壞的特性， 破壞皮膚黑色素， 使皮膚脫色，建立白dian風(fēng)模型。

2.2、方法：體重 200 g 左右， 花黑色豚鼠， 雌雄各半， 背部脫毛， 脫毛面積約 4 cm × 4 cm。脫毛后用生理鹽水清洗脫毛局部， 局部脫毛區(qū)均無(wú)損傷。在脫毛區(qū)涂 5% 過(guò)氧化qing溶液 1 mL， 每天2 次， 上午和下午各 1 次 ( 每次 0. 5 mL， 每次先涂0. 25 mL，10 min后再同量涂 1 次) ， 連續(xù) 50 d， 可制備豚鼠白dian風(fēng)模型。在此期間， 各組豚鼠每 3 d 脫毛 1 次。本模型可持續(xù) 50 -60 d。

3、莫諾苯宗乳膏脫色法制備小鼠白dian風(fēng)模型

3.1、原理：通過(guò) TYR與活性氧自由基( ROS) 的相互作用， 引起系統(tǒng)性的自身免疫反應(yīng)， 并作用于黑素細(xì)胞， 從而導(dǎo)致色素脫失， 與職業(yè)暴露性的白dian風(fēng)無(wú)明顯差異。

3.2、方法 ：C57BL /6 小鼠， 雄性 ( 雌性) ， 體重20 g左右， 脫去背部黑色毛， 脫毛面積約 2 cm ×2 cm， 脫毛后用生理鹽水清洗脫毛局部， 局部脫毛區(qū)均無(wú)損傷。每天用刮勺稍用力涂抹 40% 莫諾苯宗乳膏 50 mg， 每天 1 次; 連續(xù) 50 d， 可制備小鼠白dian風(fēng)模型。本模型可持續(xù) 50 -65 d。

過(guò)氧化氫誘導(dǎo)動(dòng)物模型建模指標(biāo)

表觀(guān)指標(biāo)：色素多少、色素面積大小、干燥脫屑情況等為白dian風(fēng)的主要表觀(guān)指標(biāo)， 可對(duì)這些表觀(guān)指標(biāo)進(jìn)行量化積分或半量化分級(jí)。白dian風(fēng)動(dòng)物模型制備成功后， 病變局部無(wú)色素， 皮膚呈蒼白或白斑狀， 干燥伴明顯脫屑等。表觀(guān)指標(biāo)是臨床白dian風(fēng)的主要診斷依據(jù)， 也應(yīng)是模型判定的依據(jù)， 權(quán)重系數(shù) 0. 5。

病理指標(biāo)：局部組織病理指標(biāo)是高倍鏡下觀(guān)察含黑色素毛囊數(shù)、含黑素顆粒的細(xì)胞個(gè)數(shù) 。白dian風(fēng)動(dòng)物模型制備成功后局部組織形態(tài)觀(guān)察， 可見(jiàn)棘層明顯增厚， 角質(zhì)層增生明顯; 按 Lillie 硫酸ya鐵染色法黑色素染色試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行黑色素染色， 黑色素毛囊數(shù)顯著降低; 高倍鏡下隨意觀(guān)察基底細(xì)胞和棘層細(xì)胞顆粒， 可見(jiàn)有黑素顆粒的細(xì)胞個(gè)數(shù)顯著減少。病理指標(biāo)是白dian風(fēng)動(dòng)物模型病理變化的直接依據(jù)， 為直接相關(guān)指標(biāo)， 權(quán)重系數(shù) 0. 3。

生化指標(biāo)：白dian風(fēng)的發(fā)生與體內(nèi)血清 TYR性密切相關(guān)， 與膽jian酯酶 ( CHE) ， 單 胺氧化酶( MAO) 活性， 丙二醛( MDA) ， 白細(xì)胞介素-6 ( IL-6)及腫瘤壞死因子-α( TNF-α) 含量等有一定關(guān)系。白dian風(fēng)動(dòng)物模型制備成功后， TYR 活性明顯下降，CHE 和 MAO 活性升高， MDA， IL-6 和 TNF-α 的含量均增加。生化指標(biāo)是白dian風(fēng)動(dòng)物模型發(fā)生、發(fā)展、康復(fù)過(guò)程的機(jī)體反映， 有一定價(jià)值， 但特異性不高， 權(quán)重系數(shù) 0.2。